불가사리 관족에서 접착단백질을 추출하는 실험을 진행하는 중 여쭤볼 게 있습니다!

Question

고등학교에서 불가사리 관족에서 접착단백질을 추출하는 방법을 찾아보던 중에

불가사리 체벽으로부터 콜라겐을 추출하는 특허를 발견하였고, 이를 참고하여 실험을 계획하였습니다.

체벽과 같이 알칼리 처리, 효소 처리, 원심분리를 거쳐 접착단백질을 추출하고자 하였지만

처리 단계 이전에 실험 도구를 이용해서 관족에서 접착단백질을 모으는 과정에서 고체 상태일 것이라는 예상과는 다르게 거의 액체 상태로밖에 모을 수가 없어 체벽과 비슷한 처리 단계를 거치기 어렵다고 판단하게 되었습니다.

1. 접착단백질을 추출하기에 더 적합한 방법이 있을까요?

2. 접착단백질이 관족에서 나오는 점액같은 물질이 맞는 걸 까요?

3. 액체 상태의 접착단백질에 알칼리 처리, 효소 처리와 같은 처리 과정을 거치지 않고 바로 원심분리하여도 괜찮을까요? (아민류 등의 이물질 문제)

   KR101640799B1 - 불가사리 추출물의 제조 방법 및 불가사리 추출물을 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents 참고한 특허입니다.

Answer 1

안녕하세요. 

불가사리 관족에서 접착 단백질을 추출해본 경험은 없으나, 첨부해주신 특허를 살펴보았습니다.

우선 불가사리와 같은 유기물에서 특정 단백질을 추출하시려면 유기물을 채취하여 단백질을 용해 시킨 후, 농축하는 과정이 필요합니다.

체벽 추출시에 액체로 채취했다는 설명이 어떤건지 정확하진 않지만 불가사리 관족 조직을 채취 및 파쇄하여 버퍼에 용해시키는 과정이 필요할 것 같습니다. 

불가사리가 녹아서 액체로만 확보되는 상황이 되었어도 불가사리를 모은 후, 기존이 알려진 프로토콜대로 실험을 수행하시는 것이 필요할 것이라 생각합니다. 

1. 접착단백질을 추출하기에 더 적합한 방법이 있을까요? -> 논문을 첨부해 드리겠습니다. 참고하시면 됩니다. 

   Characterization of the adhesive proteins secreted by the tube feet of the sea star Asterias rubens.

    Journal of Experimental Biology, 214(5), 727-736.

2. 접착단백질이 관족에서 나오는 점액같은 물질이 맞는 걸 까요? -> 불가사리 관족 파쇄 후, 버퍼에 용해시키신 후, 원심분리 돌려서 sds-page등을 내려서 해당 단백질이 맞는지 확인이 필요합니다.

3. 액체 상태의 접착단백질에 알칼리 처리, 효소 처리와 같은 처리 과정을 거치지 않고 바로 원심분리하여도 괜찮을까요? (아민류 등의 이물질 문제) -> 버퍼에 처리해야 단백질이 용해됩니다. 유기체 내 단백질은 세포막을 깨야 방출되기때문에 해당 과정이 필요합니다. 

   참고로, 단백질 추출과정은 4도씨에서 진행되어야 단백질이 분해되지 않고 확보될 수 있습니다. 꼭 아이스 위에서 수행하시고, 샘플은 -20도씨 이하에서 보관하셔야 합니다!

   추가 질문사항이 있으시면 말씀 부탁드려요