활성산소 신호전달역할을 확인 하는 실험이나 자료
식물의 기공이 열리고 닫히는 것에 활성산소가 관여 하는 것을 확인할 수 있나요?여기에서 신호 전달이 작용 한다는 것을 확인하고 싶어요. 만약 관련이 없다면 활성산소의 신호전달 역할을 확인할 수 있는 실험이나 자료 같은 게 어떤 것이 있을까요? 형광 또는 식물 세포로 생각하고 있습니다.
안녕하세요. 이상현 전문가입니다.
식물의 기공계페에는 활성산소가 칼슘신호를매게하는 신호전달자로 작용합니다.
그래서 활성산소 탐지염료를 공변세포에 처리하고
스캐빈저를 처리하여 신호변화를 관찰하면ROS신호전달 역할을 검증할 수있습니다.
감사합니다.
안녕하세요. 김채원 전문가입니다.
식물의 기공은 앱시스산, 이산화탄소 증가, 오존자극등에따라 NADPH 산화효소가 활성화되고, 과산화수소와같은 활선산소가 급격히늘어나며, 이것을 칼슘신호를 통해 기공읃 닫히게 만듭니다.
실험적으로 확인할 수 있는 방법으로는 활성산소 형광탐지염료인 H2DCF-DA나 활성산소 특이 탐지 단백질 센서를통해 공변세포에서 현미경으로 관찰하고, 돌연변이체나 저해제, 스캐빈저처리, 혹은 외부 과산화수소처리를통해서 원인과 결과 관계를 확인할 수 있습니다.
네, 식물의 기공이 열리고 닫히는 과정에 활성산소(ROS)가 관여한다는 것을 확인할 수 있는데, 이는 활성산소가 중요한 신호 전달 물질로 작용하기 때문입니다.
이러한 신호 전달 과정을 확인하기 위해서는 H2DCFDA같은 형광 지시약을 사용하여 공변세포 내 활성산소의 양을 측정하는 해볼 수 있습니다.
그리고 만약 활성산소의 다른 신호 전달 역할을 확인하고 싶다면, 식물 면역 반응 실험을 활용하면 됩니다. 병원균 침입 시 활성산소의 폭발적인 증가를 보실 수 있을 겁니다.
식물의 기공 개폐에 활성산소가 신호전달 물질로 작용하는 것은 공변세포에 앱시스산(ABA)을 처리하여 기공 닫힘을 유도하는 과정에서 확인할 수 있습니다. 이때 H2DCF-DA와 같은 활성산소에 반응하는 형광 염료를 사용하면, 앱시스산을 처리한 공변세포에서 활성산소의 생성이 증가하여 형광이 강해지는 것을 현미경으로 관찰할 수 있습니다. 반대로 DPI와 같이 활성산소 생성을 억제하는 저해제나 아스코르브산 같은 활성산소 제거제를 먼저 처리한 후 앱시스산을 처리하면, 활성산소 생성이 억제되면서 기공이 닫히지 않는 현상을 통해 활성산소의 신호전달 역할을 증명할 수 있습니다.